Антитела из головного мозга рассеянного склероза идентифицировали эпитопы ядерного антигена 1 и 2 вируса Эпштейна-Барра, которые распознаются олигоклональными полосами
Используя фаговую пептидную библиотеку, мы провели скрининг IgG, очищенного из периферической бляшки головного мозга после смерти от пациента с острым рассеянным склерозом. Эти IgG связывались с фаговыми пептидами, представляющими эпитопы ядерных антигенов вируса Эпштейна-Барра 1 и 2 (EBNA1 / 2).
. Эпитоп EBNA1, в частности, распознавался IgG от 46 пациентов с MS, в то время как IgG от пациентов с воспалительным контролем имел значительно меньшее связывание. Кроме того, олигоклональные полосы пациентов с MS как из сыворотки, так и из спинномозговой жидкости также распознали эпитоп EBNA1 фагового дисплея.
Эти данные подтверждают потенциальную возможность инфицирования ВЭБ и ответной реакции как фактора этиологии MS и прогрессирования заболевания.
Задний план
Рассеянный склероз (MS) — хроническое воспалительное демиелинизирующее заболевание центральной нервной системы (ЦНС), этиология которого недостаточно изучена. Наиболее частыми лабораторными отклонениями, связанными с MS, являются повышенный интратекальный синтез IgG и наличие олигоклональных полос (ОКБ) в головном мозге и спинномозговой жидкости (ЦСЖ). Однако основные антигенные мишени этих ответов антител неизвестны. Риск MS увеличивается после инфекционного мононуклеоза (ИМ) из-за инфекции ВЭБ, и пациенты с MS имеют более высокие титры антител против ВЭБ в сыворотке, чем контрольные группы населения.
Цели
Идентифицировать относящиеся к заболеванию эпитопы антител IgG при MS.
Методы
Мы провели скрининг отображаемых на фаге случайных пептидных библиотек (12-мерных) с общими антителами IgG, очищенными из мозга пациента с острым рассеянным склерозом. Мы идентифицировали и охарактеризовали фаговые пептиды по специфичности связывания с интратекальным IgG от пациентов с MS и из контрольной группы с помощью ELISA, фаг-опосредованной иммуно-ПЦР и изоэлектрического фокусирования.
Полученные результаты
Были идентифицированы два фаговых пептида, которые имеют гомологию последовательностей с ядерными антигенами 1 и 2 EBV (EBNA1 и EBNA2) соответственно. Специфичность эпитопов EBV, обнаруженная при пэннинге с использованием IgG головного мозга MS, была подтверждена с помощью ELISA и анализов конкурентного ингибирования. Используя высокочувствительный фаг-опосредованный иммуно-ПЦР анализ, мы определили специфические связывания двух эпитопов EBV с IgG из CSF у 46 пациентов с MS и 5 пациентов с контролем воспаления (IC). IgG MS CSF имеют значительно более высокие связывания с эпитопом EBNA1, чем с эпитопом EBNA2, тогда как EBNA1 и EBNA2 существенно не различались по связыванию с IgG IC CSF. Кроме того, эпитоп EBNA1 распознавался олигоклональные полосы из нескольких MS CSF, как показано в анализах блоттинга с образцами, разделенными с помощью изоэлектрического фокусирования.
Выводы
Эпитоп EBNA1 реагирует на интратекальные антитела MS, соответствующие олигоклональным полосам. Это усиливает потенциальную роль ВЭБ в этиологии MS.
