Идентификация гетерокомплекса флотиллин-1/2 как мишени аутоантител при доброкачественном рассеянном склерозе

Аутоантитела, в частности, против аквапорина-4 и гликопротеина миелин-олигодендроцитов (MOG), помогают в качестве биомаркеров в дифференциальной диагностике демиелинизации. Здесь мы сообщаем об обнаружении аутоантител против флотиллина у пациентов с рассеянным склерозом (MS).

методы

Целевой антиген был идентифицирован гисто-иммунопреципитацией с использованием сывороток пациентов и криосекций мозжечка крысы или свиньи в сочетании с масс-спектрометрическим анализом. Правильная идентификация была подтверждена косвенными иммунофлуоресцентными и нейтрализующими тестами с использованием антигенов-мишеней, рекомбинантно экспрессируемых в клетках HEK293.

Результаты

Сыворотка и CSF у пациента с индексом вызывали мелкозернистое непрямое иммунофлуоресцентное окрашивание IgG молекулярного слоя гиппокампа и мозжечка. Флотиллин-1 и флотиллин-2 были идентифицированы как целевые аутоантигены. Они также реагировали с рекомбинантным человеческим флотиллином-1/2, коэкспрессированным в клетках HEK293, но не с отдельными флотилинами в анализах с фиксированными и живыми клетками. Более того, нейтрализация с использованием флотиллина-1/2, а не отдельных флотилинов, устраняет реактивность тканей сыворотки пациента. Скрининг 521 пациента, для которого было запрошено анти-аквапорин-4 тестирование и был отрицательным, выявил еще 8 пациентов с аутоантителами анти-флотиллин-1/2. Все восемь были отрицательными для анти-MOG. Шесть пациентов бывшихвыполнил пересмотренные критерии McDonald для MS. Напротив, скрининг 538 MS сывороток выявил антифлотиллин-1/2 аутоантитела у восьми пациентов. Аутоантитела не были обнаружены в когорте из 67 пациентов с другими ассоциированными с нейронными аутоантителами синдромами и у 444 здоровых доноров крови.

Выводы

Аутоантитела против гетерокомплекса флотиллин-1/2, белка периферической мембраны, который участвует в разрастании аксонов и регенерации зрительного нерва, присутствуют у 1–2% пациентов с доброкачественном РС.